基质胶是3D细胞培养、类器官构建、肿瘤侵袭实验等领域的核心耗材，其质量直接影响实验结果的可重复性。然而，基质胶对温度敏感，易因反复冻融或操作不当而降解，因此正确的分装方法是保证实验稳定性的关键。本文将详细介绍基质胶的科学分装流程及注意事项。
一、分装前的准备工作
1.基质胶的解冻
①基质胶通常以固态形式运输（-20℃或干冰保存），使用前需在4℃冰箱避光过夜解冻。
②禁止置于冰箱门架或频繁开关的冷藏区，避免温度波动导致部分凝胶化。
③若蛋白浓度较高，可能需要更长时间（18-24小时）全部解冻。
2.工具准备
①预冷的移液管/吸头（-20℃预冷2小时以上）和1.5mL/2mL离心管（EP管）。
②超净工作台（确保无菌操作）及冰盒（维持低温环境）。
③70%乙醇（用于操作台面消毒）。
二、分装操作流程
1.解冻与混匀
①将基质胶小瓶从-20℃取出，立即放入4℃冰箱避光解冻（避免光照导致生长因子失活）。
②解冻后，用预冷的移液管轻柔吹打基质胶（或短暂涡旋），确保其均匀无沉淀（尤其高浓度批次）。
2.无菌分装
①在超净台内操作，将预冷的EP管插在冰盒上，保持低温环境。
②使用预冷的移液管吸取基质胶（动作缓慢，避免气泡产生），按实验需求分装：
常规分装量：50-200μL/管。
厚胶实验（3D培养）：建议200-500μL/管。
③分装后立即旋紧管盖，避免水分蒸发或污染。
3.储存与标记
①分装后的基质胶置于≤-20℃避光保存（有效期通常2年），避免反复冻融。
②标记清晰：注明分装日期、浓度、批次号及用途。
三、关键注意事项
1.温度控制
①全程保持低温：移液管、EP管、基质胶均需预冷，操作时基质胶始终置于冰上。
②禁止接触高温：基质胶在10℃以上会快速凝胶化，若意外凝固，可放回4℃冰上24-48小时回融。
2.避免污染
①所有耗材（移液管、EP管、培养板）需4℃预冷并灭菌。
②操作时佩戴手套，用70%乙醇消毒工作台面，避免手温导致基质胶局部固化。
3.减少浪费
①初次解冻后建议一次性分装完毕，避免多次解冻影响活性。
②若实验剩余基质胶，不可留存再用（凝胶化后即使回融也可能降解）。
四、分装后的使用建议
1.薄胶法：37℃孵育30分钟固化，适用于细胞贴壁实验。
2.厚胶法：含细胞混合后铺胶，用于类器官或血管生成研究。
3.Transwell侵袭实验：基质胶需按1:4~1:8稀释。
总结
基质胶的分装看似简单，实则每一步都需严格控温、无菌操作并精准定量。通过规范化的分装流程（解冻→混匀→预冷工具→分装→-20℃储存），可最大限度保持基质胶的生物活性，确保3D培养、肿瘤模型等实验的重复性与可靠性。科研工作者务必重视这一关键步骤，为高质量实验数据奠定基础！
更新时间：2025-11-11 
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